核心技术

甲基化技术介绍

DNA甲基化是指针对DNA序列上的CpG岛,由甲基化转移酶将S腺苷甲硫氨酸的甲基转移给胞嘧啶。其中,5’甲基胞嘧啶(5mC) 的甲基化是一个非常重要的表观遗传学修饰事件,该事件能够调控基因活性,并影响着如细胞分化、转录调控和染色质重塑等生物学过程。

随着下一代测序技术(NGS)技术的发展,使我们能够从全基因组水平来分析5’甲基胞嘧啶及组蛋白修饰等事件,由此能够发现很多传统的基因组学研究所不能发现的东西,这就是所谓的“DNA甲基化测序”!

◆ 甲基化测序原理与通常基因测序一样;亚硫酸氢盐“预处理“是最根本区别;

◆ 通过亚硫酸氢盐处理,未发生甲基化的“C”都转变成立“U”;发生甲基化的“C”,都未发生变化;

◆ 经过“预处理”后的DNA,再次进行PCR扩增,扩增后的底物就可以进行序列测定了;

◆ 通过一系列的如酶切、富集等工艺改良,使得对CpG岛的甲基化测序更加有效率;

◆ 由于进行了“预处理”,在生信分析上,工作量大大提高。

甲基化高通量测序流程